獣医学と医療診断ジャーナル

冬季赤痢の血清学的検出のための組換えヌクレオカプシドタンパク質ベースの酵素結合免疫吸着法の開発

カノクワン シンガサ、タウィーサック ソンサーム、プリーダ レルトワチャラサラクル、シリルク ジャラ、サクナ パタナクナナン、ピパット アルンヴィパス

冬季赤痢は、タイの農場の乳牛に悪影響を及ぼす急性で伝染性のウイルス性疾患です。冬季赤痢に対する抗体検出用に開発された組み換えヌクレオカプシド (rN) タンパク質に基づく間接酵素結合免疫吸着測定法 (ELISA) が、大腸菌タンパク質発現システムによって作成されました。エピトープ抗原 N タンパク質は、ほぼすべての N 遺伝子フラグメント (8-430 aa、N 遺伝子) を使用して設計されました。rN タンパク質として約 48 kDa であることが確認され、ウエスタンブロット分析によりウシコロナウイルス乳牛陽性血清に結合できます。ELISA 法の条件は最適化されました。rN タンパク質は、コーティング抗原濃度 5 μg/ウェルで標準化されました。rN タンパク質は、感染乳牛と非感染乳牛の両方の血清でテストされました。チェッカーボード滴定を使用して、一次抗体の希釈度は 1:50 であることが確認されました。検査内および検査間の再現性は良好でした。補正された OD450 値の平均値 ± 2SD (標準偏差) からのカットオフは 0.049 に設定されました。開発された rNELISA と SVANOVIR® BCV-Ab ELISA キットの特異度、感度、精度はそれぞれ 96.3、84.8、86.1% でした。開発された ELISA と市販の検査キットの Cohen のカッパ値は 0.71 でした。これら 2 つの検査の吸光度の相関係数は 0.68 でした。組み換えヌクレオカプシドタンパク質 ELISA 法は、牛コロナウイルスの診断と監視に役立つ可能性があります。