獣医学と医療診断ジャーナル

ヤギの消化管線虫におけるベンズイミダゾール耐性の検出のための3つの代替方法の比較

AK ディクシット、G ダス、プージャ ディクシット

本調査は、ジャバルプルのアマナラ農場のヤギの消化管内線虫におけるベンズイミダゾール耐性状況を、in vivo 糞便卵数減少試験 (FECRT)、in vitro 卵孵化試験 (EHA) および分子試験 - 対立遺伝子特異的 PCR (AS-PCR) を用いて調査する目的で計画された。FECRT および卵孵化試験は、Coles ら (2006) が説明したように実施した。AS-PCR は、Chandra ら (2015) に従って若干の変更を加えて実施した。FECR 試験では、フェンベンダゾールは糞便中の卵数を 23% 減少させ、信頼区間の下限は -32% であった。Haemonchus contortus、Trichostrongylus spp.、Oesophagostomum spp.、Strongyloides spp. および Bunostomum spp.処理前の糞便培養では、耐性を示す主要な線虫はH. contortus (92%) で、次いでOesophagostomum spp. (8%) であることが明らかになりました。チアベンダゾールの有効用量 (ED50) 値は0.335 μg/mlで、卵孵化試験でベンズイミダゾール耐性線虫の存在が確認されました。分子試験では、ネステッドPCRアンプリコンのサイズは約820 bpで、RsaI RFLP消化断片は、550 bp、170 bp、および100 bpの主要な断片を示しました。感受性対立遺伝子特異的遺伝子、耐性対立遺伝子特異的遺伝子、および非対立遺伝子特異的遺伝子のサイズは、それぞれ603 bp、222 bp、および774 bpでした。 AS-PCR の結果、H. contortus 幼虫の 62% がホモ接合耐性 (rr)、24% がヘテロ接合 (rS)、14% がホモ接合感受性 (SS) であることが示されました。ベンズイミダゾール耐性アレル (r) の有病率も、感受性アレル (S) (26%) と比較して有意に (p<0.01) 高かった (74%)。すべてのテストの結果はベンズイミダゾール耐性線虫の存在を示しましたが、FECRT は耐性線虫の属を明らかにし、AS-PCR は H. contortus 集団の遺伝子型 (rr、rS、SS) も検出しました。