獣医学と医療診断ジャーナル

家禽のマレック病を引き起こすウイルスを検出するための電流測定型遺伝子センサー

プーナム ナンダル、ラーフル カトリ、ヴィシャハ アガルワル、ラヴィナ、ミナクシ プラサド、ハリ モハン、チャンドラ S. パンディル

24のデオキシヌクレオチドからなるMeq発癌遺伝子の5'-チオール化DNAプローブをジチオトレイトール（DTT）で還元し、チオール化結合を介して金電極上に共有結合で固定し、続いてニワトリの腫瘍サンプルからの1-4 ng/μlのマレック病ウイルス（MDV）一本鎖（ss）DNAプローブと室温で10分間ハイブリダイゼーションを行った。Meqgenosensorは、サイクリックボルタンメトリー（CV）、微分パルスボルタンメトリー（DPV）、電気化学インピーダンス（EI）により、腫瘍サンプル中の1 ngss-DNAを1分で検出することができた。ssDNA修飾Au電極は、フーリエ変換赤外分光法（FTIR）と走査型電子顕微鏡（SEM）によって特性評価された。 Meq遺伝子の検出用に、ssDNA電極修飾Au電極（作用電極）をAg/AgCl電極（参照電極）およびPt線（補助電極）とポテンショスタットを介して接続して、アンペロメトリックジェノセンサーを構築しました。ssDNAプローブとターゲットssDNAのハイブリダイゼーションは、メチレンブルー（MB）と一本鎖オリゴヌクレオチドの遊離G'との相互作用によって発生する電流の減少によって検出されました。ssDNA Au電極は、pH8、250Cで10分以内に最適電流を示しました。これは、鶏におけるMDVの簡単、迅速、かつ特異的な検出のためのジェノセンサーの構築に関する最初の報告です。