分子生物学と方法のジャーナル

胎盤gDNAとmRNAを用いたqRT-PCRによるラット胎児性別判定の比較

アンソニー・L・スーとリタ・ロック・カルーソ

胎児の性別を生物学的変数として考慮し、性別特有の影響を正確に評価する必要性が高まっています。胎児の性別を判定するために使用される複数の方法の中で、Sry（性別判定領域Y）とゲノムDNA（gDNA）の定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（qRT-PCR）は、トランスクリプトミクスやバー小体の検出などの方法論の使用に加えて一般的に使用されています。しかし、SrygDNAの産物であるSryメッセンジャーRNA（mRNA）は、これまで性別判定のために評価されたことはありませんでした。本研究では、妊娠16日目（GD）のタイミング妊娠Wistarラットの胎盤サンプルを使用して、胎児の性別を判定するためのgDNAとmRNAを使用したSry検出の適合性を評価しました。この現在の研究で使用されたサンプルは、トリクロロエチレン（TCE）の生殖毒性と、N-アセチル-L-システイン（NAC）およびアミノオキシ酢酸（AOAA）による潜在的な調節を調査したより大規模な研究から来ています。 91 サンプル中 90 サンプルで、gDNA によって決定された性別分類は、Sry (Sry/B2m) 値を解析した mRNA によって決定された性別分類と一致しました。gDNA と mRNA の両方について、サンプル全体とサンプルを治療グループごとに分けた場合に、男性と女性の間で Sry/B2m 値の統計的に有意な差が見られました (すべての比較は p<0.01 以下で、2 つを除くすべての比較は p<0.001 以下でした)。最後に、胎児の性別と B2m 参照遺伝子を決定するために SryCq 値を使用することの妥当性についても議論されました。これらを合わせると、この研究は、ウィスターラットの胎児の性別の決定は、gDNA または mRNA の Sry 測定を使用して、非常に適合性の高い結果で達成できることを示唆しています。