免疫学的技術と感染症のジャーナル

高病原性鳥インフルエンザウイルスH5N1亜型の検出のためのリアルタイム蛍光定量ポリメラーゼ連鎖反応（PCR）の確立

Miao-lian Tan、Yuan-yuan Niu、Wei Shui、Jiancong Lin、Ming Li、Changran Zhang

鳥インフルエンザウイルス（AIV）の高病原性株はインフルエンザAウイルスであり、家禽や人間に重篤な疾患を引き起こします。本研究の目的は、高病原性鳥インフルエンザウイルス（AIV）サブタイプH5N1を検出するための蛍光定量RT-PCRアッセイを確立することです。H5およびN1サブタイプ特異的プローブセットは、中国で検出された鳥インフルエンザウイルス配列に基づいて開発されました。2対のプライマーと2つの蛍光プローブは、反応システムで厳密に設計され、最適化されました。H5N1株から抽出されたプラスミドRNAの量に応じて、蛍光定量PCRの標準曲線DWQBGWDWQBGWが描かれ、すべての検体はリアルタイムPCRによってテストされました。高病原性AIVサブタイプH5N1のテストは特異的であることが確認され、その感度レベルは102〜103コピー/反応でした。標準曲線は109〜105 DNAコピー/反応で達成されました。ウイルスRNAの抽出から検査の完了まで、わずか3時間しかかかりませんでした。検査は簡単に実施でき、再現性も非常に高いものでした。結論として、ここで説明した蛍光定量PCRは、H5遺伝子だけでなくN1遺伝子も検出できる、迅速で特異的かつ感度の高い方法を提供します。