免疫学的技術と感染症のジャーナル

犬のモルビリウイルス検出のためのラテラルフローアッセイの最適化とサンプル代替品としてのストリップの適用

Monu Karki*、KK Rajak、Praveen Singh、Arfa Fayaz、Kiran、Mukesh Bhatt、Vishal Rai、Chris Einstein、Ajay Kumar Yadav、RP Singh

犬ジステンパーとは、パラミクソウイルス科の犬モルビリウイルス（CDV）によって引き起こされる新興疾患です。このウイルスは、多くの野生動物種に影響を及ぼすことから、多宿主病原体として進化しています。特異的かつ感度の高い診断検査の開発は、制御プログラムに必要です。CDV抗原および抗体の検出には、いくつかの診断検査が利用可能です。ラテラルフローアッセイ（LFA）は、その特異性、使いやすさ、即時結果のため、最も有望なポイントオブケア診断検査です。この研究は、インドで循環している株を代表する「CDV/dog/bly/Ind/2018」分離株のヌクレオカプシドタンパク質（N）に対する社内開発モノクローナル抗体（mAb）を使用して、ラテラルフローアッセイを開発するように設計されました。研究に含まれる2つのmAbは、間接ELISAおよびドットブロットアッセイで高い結合親和性を示しました。 2 つのうち、LFA 形式での結合親和性が比較的高く、生物学的マトリックスおよび緩衝液成分への非特異的結合が少ないという理由で、1 つの mAb が選択されました。現場で採取された新鮮な臨床サンプルは LFA によって明確に検出されましたが、ウイルスの力価が低下した保存サンプルは一貫性のない結果を示しました。さらに、血液サンプルは綿棒や組織ホモゲネートよりも陽性と陰性が明確に区別されました。Trizol RNA 抽出法にいくつかの変更を加えることでストリップからの RNA 抽出が成功し、N および H 遺伝子フラグメントが増幅されました。したがって、この研究では、LFA は現場条件での CDV 抗原検出に適しており、ストリップは分子研究のサンプル代替品として使用できると結論付けられています。