免疫学的技術と感染症のジャーナル

プロテイン A、プロテイン G、プロテイン A/G を用いた豚繁殖・呼吸器症候群ウイルスおよび豚サーコウイルス 2 型に対する抗体の検出のための蛍光マイクロスフィア免疫測定法

モハメッド・M・ホセインとレイモンド・RR・ローランド

本研究の目的は、二次抗体の代わりに非種特異的複合体タンパク質A、G、およびA / Gを組み込むことにより、豚繁殖・呼吸器症候群ウイルス（PRRSV）および豚サーコウイルス2型（PCV2）特異的IgG抗体を検出するためのマルチプレックス蛍光マイクロスフィア免疫測定法（FMIA）を開発することであった。PRRSVおよび/またはPCV2に実験的に感染させた豚から採取した合計205の血清サンプルを検査した。組み換え抗原を生成するために、PRRSV核タンパク質（N）およびPCV2カプシドタンパク質（CP）を大腸菌で発現させ、ニッケルアフィニティーカラムで精製した。精製したタンパク質をカルボキシル化マイクロスフィアビーズに​​共有結合させた。4つの標的抗原を単一のマルチプレックスに組み立て、PRRSVまたはPCV2に感染または同時感染した豚の血清に対して検査した。プロテイン A、G、および A/G は、二次コンジュゲートのブタ IgG の代わりにテストされています。すべてのコンジュゲートは抗体を検出でき、PRRSV および PCV2 抗原ターゲットに対する IgG 応答の検出は、A > A/G > G と変化しました。種特異的な試薬がない場合、プロテイン A、G、および A/G の組み込みは適切な代替品となります。