神経科学と臨床研究のジャーナル

MyoD:n vasta-aine vähentää myogeniinigeenin ilmentymistä ja agriinin aiheuttamaa asetyylikoliinireseptoriklusterointia

Erica E Anderson, David H Campbell, Kelly Ezell, Paul R Standley ja Wade A Grow

Tavoite: Myogeenisten säätelytekijöiden perhe, mukaan lukien MyoD ja myogeniini, ohjaavat myogeneesiä ja hermo-lihassynapsien muodostumista. MyoD aktivoi myogeniinin geenin ilmentymisen, ja yksi myogeniinin tehtävistä on aktivoida asetyylikoliinireseptorin (AChR) geeniekspressio hermo-lihassynapsissa. Motoriset neuronit vapauttavat agriinia, kun ne ovat lähellä luurankolihaskuituja kehittyessään, mikä ajaa olemassa olevien AChR:ien klusteroitumisen hermo-lihassynapsin muodostumiskohtaan. Olemme aiemmin osoittaneet, että jatkuva altistuminen vasta-aineelle MyoD:lle tai myogeniinille vähentää agriinin aiheuttamaa AChR-klusterointia C2C12-luurankolihassoluviljelmässä. Tavoitteenamme oli selvittää tarkemmin, miten MyoD ja myogeniini ovat vuorovaikutuksessa kehityksessä. Menetelmät: C2C12-soluviljelmät altistettiin kokeellisille manipuloinneille, mukaan lukien vasta-aineet MyoD:lle ja myogeniinille ja myogeniinin morfolinolle. Endo-Porteria käytettiin lisäämään solujen sisäänottoa kokeellisissa manipulaatioissa. AChR-klusterointimääritykset suoritettiin vasta-aineen tai morfolinon vaikutuksen arvioimiseksi agriinin aiheuttamaan AChR-klusteroitumiseen. Western blot -testit suoritettiin myogeniinigeenin ilmentymisen arvioimiseksi vasta-aine- tai morfolinoaltistuksen jälkeen. Tulokset: Tässä raportoidut tulokset osoittavat, että jopa kahdeksan tunnin altistuminen vasta-aineelle myogeniinille voi vähentää agriinin aiheuttamaa AChR-klusteroitumista myoputkissa. Olemme aiemmin osoittaneet, että jotkin kokeelliset manipulaatiot vähentävät myogeniinigeenin ilmentymistä samanaikaisesti agriinin aiheuttaman AChR-klusteroinnin vähenemisen kanssa. Nykyiset tulokset osoittavat tarkemmin, kuinka MyoD ja myogeniini ovat vuorovaikutuksessa hermo-lihassynapsien muodostumisessa osoittamalla, että altistuminen MyoD:n vasta-aineelle vähentää myogeniinigeenin ilmentymistä samanaikaisesti agriinin aiheuttaman AChR-klusteroinnin vähenemisen kanssa. Johtopäätös: Nämä tulokset viittaavat siihen, että MyoD on välttämätön agriinin indusoimalle AChR-klusteroitumiselle mekanismin kautta, joka sisältää myogeniinigeenin ilmentymisen aktivoitumisen, mikä johtaa AChR-geenin ilmentymisen aktivoitumiseen ja lopulta sopivan AChR-tason tuottamiseen agriinin aiheuttamaa AChR-klusterointia ja neuromuskulaarinen synapsin muodostuminen.